Санитарно-бактериологические исследования
САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗДУХА
Цель работы: Освоить методику санитарно-бактериологического исследования воздуха.
Общие сведения
При исследовании бактериальной загрязненности воздуха учитывается общее количество микробов, содержащихся в определенном объеме воздуха, и качественный состав микрофлоры воздуха.
В воздухе закрытых помещений содержится большое количество сапрофитов - сарцины, пигментные бактерии, спорообразующие палочки, грибы. Дрожжи и так далее.
Санитарно-показательными микроорганизмами воздуха являются а- зеленящий стрептококк, Р-гемолитический стрептококк, гемолитический стафилококк.
Санитарно-бактериологическое исследование воздуха проводится двумя методами: седиментационным и аспирационным.
Седиментационный метод (по Коху) - оседание микробов под действием силы тяжести. Метод заключается в том, что чашки Петри со средой оставляют открытыми на определенное время (5-10 минут на общую обсемененность и не менее 40 минут на кокковую микрофлору), затем их закрывают, надписывают и выдерживают 24 часа в термостате и 24 часа при комнатной температуре. Количество выросших колоний соответствует степени загрязненности воздуха: по приблизительному подсчету на площадь 100см2 в течение 5 минут оседает столько микробов, сколько их содержится в 10 л воздуха.
Аспирационный метод может быть осуществлен с помощью аппарата Кротова, который дает возможность исследовать определенный объем воздуха. Аппарат смонтирован в портативном ящике и состоит из узла для отбора проб воздуха, микроманометра и электромотора.
Исследуемый воздух просасывается через клиновидную щель прозрачного диска из плексигласа, установленного на центробежном вентиляторе. Засасываемый воздух распределяется по поверхности питательной среды чашки Петри, помещенной на вращающемся устройстве. Чашка со средой должна вращаться со скоростью 60 оборотов в минуту, что гарантирует равномерное распределение оседающих микроорганизмов по поверхности питательной среды. Скорость просасывания при отборе проб должна быть 25 л в минуту с экспозицией 4-5 минут для определения общего количества микробов и экспозицией 10-15 минут для обнаружения кокков.
Практическая часть.
Приборы, реактивы, посуда: чашки Петри, питательный агар, термостат.
Методика выполнения работы
Приготовить питательную среду питательный агар. Разлить среду в 2 чашки Петри, охладить до комнатной температуры. Чашки Петри с питательными средами оставить открытыми в местах отбора проб воздуха в течение 10 минут.
Затем чашки закрыть и поместить в термостат при температуре 37°С на 24 часа. После этого чашки выдерживать при комнатной температуре 1 сутки.
О степени загрязненности воздуха судят по количеству выросших на поверхности чашек Петри колоний.
Контрольные вопросы.
1. Какие санитарные требования предъявляют к воздуху в помещениях пищевых предприятий?
2. Какие санитарно-показательные микроорганизмы определяют в воздухе?
3. В чем заключаются методы качественного и количественного определения микроорганизмов в воздухе.
САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВОДЫ.
Цель работы: приобретение навыков определения микробного числа и коли-титра воды.
Общие сведения
Для санитарно-бактериологической характеристики воды проводятся исследования микробного числа, коли-титра, коли-индекса воды и обнаружение в воде патогенных представителей кишечной группы микробов. Определение общей микробной обсемененности определяется количеством микроорганизмов, содержащихся в 1 мл воды. Результаты обнаружения кишечной палочки в воде регистрируются в виде коли-титра или коли- индекса.
Практическая часть
Приборы, реактивы, посуда пробирки, чашки Петри, питательный агар, термостат, мембранные фильтры №3, воронки, насос Комовского, среда Эндо, глюкозо-пептонная среда (среда Эйкмана).
Методика выполнения работы
В стерильные флаконы с пробкой, вместимостью 0,5 л отбирают водопроводную воду. Исследуемую воду разводят стерильной водой 1:10 и 1:100. Затем 1 мл каждого разведения стерильной пипеткой вносят в стерильные чашки Петри. В каждую чашку Петри вливают по 15 мл расплавленного и остуженного до 45°С МПА, равномерно распределяя содержимое по дну чашки Петри. Остывшие чашки переворачивают вверх дном и помещают в термостат на 24 часа при температуре 37 °С. Затем производят подсчет выросших колоний. Число выросших колоний соответствует количеству микроорганизмов в засеянном объеме воды. Считают число колоний, выросших в каждой чашке, затем умножают на соответствующее разведение. Полученное число является показателем общей микробной обсемененности воды. Водопроводная вода должна иметь микробное число, не превышающее 100 в 1 мл.
Для определения титра кишечной палочки используют мембранные фильтры №3. Перед фильтрованием фильтры помещают в дистиллированную воду температуры 50-60° С и кипятят 2-3 раза по 10-15 минут с обязательной сменой воды. Обработанный фильтр помещают в воронку. Проводят фильтрацию с помощью насоса Комовского. Затем фильтр снимают стерильным пинцетом и накладывают на среду Эндо в чашке Петри. Чашки помещают в термостат на 24 часа, подсчитывают количество выросших колоний, типичных для кишечной палочки. Для идентификации выросших колоний с кишечной палочкой делают посев на глюкозо-пептонную среду (Эйкмана). При наличии характерного роста на этой среде (помутнение и газ) дают положительный ответ.
Контрольные вопросы
1. Дайте определение коли-титра и коли-индекса.
2. Какие существуют методы определения титра кишечной палочки? Рекомендуемая литература
САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СМЫВОВ С РУК, ОДЕЖДЫ, ИНВЕНТАРЯ И ОБОРУДОВАНИЯ
Цель работы: Освоение методики проведения смывов с рук, одежды, инвентаря, оборудования.
Общие сведения
Основным видом лабораторного контроля за соблюдением санитарного режима на предприятиях пищевой промышленности является бактериологическое исследование смывов с рук, одежды, инвентаря, оборудования, с целью установления степени их бактериального обсеменения и загрязнения БГКП.
Смывы с оборудования и инвентаря производят перед началом работы либо после санитарной обработки в санитарные дни.
Смывы с рук производят перед началом работы, после пользования туалетом.
Практическая часть.
Приборы, реактивы, посуда термостат, чашки Петри, ватные тампоны, пипетка, изотонический раствор хлорида натрия, молочно-солевой агар, пробирки, среда Кеслера.
Методика выполнения работы
Стерильные тампоны на стеклянных или металлических палочках
увлажняют физиологическим раствором, разлитым по 2 мл в стерильные пробирки непосредственно перед взятием смыва. Смывы с крупного оборудования и инвентаря берут с поверхности 100 см2 в разных местах исследуемого предмета. Для ограничения поверхности используют шаблон.
Для взятия смывов с санитарной одежды протирают 4 площадки по 25см2: нижнюю часть каждого рукава и две площадки с верхней и передней части спецовки.
При взятии смывов с рук протирают тампоном ладони обеих рук, проводя не менее 5 раз по одной ладони и пальцам, затем протирают участки между пальцами, ногти и под ногтями.
Смывы исследуют на обнаружение бактерий группы кишечной палочки и определение наличия коагулозоположительных стафилококков.
1. Определение коагулозоположительных стафилококков.
Для этого производят посев непосредственно тампоном на чашки Петри с молочно-солевым агаром.
2. Выявление БГКП.
Для этого посев производят в среду накопления, для чего тампон погружают в среду Кеслера, разлитую в пробирки по 5-10 мл.
Чашки Петри и пробирки с исследуемым материалом помещают в термостат при температуре 37°С на 48 часов. По истечении этого времени подсчитывают колонии микроорганизмов и наблюдают за изменение среды Кеслера. БГКП и коагулозоположительные стафилококки должны отсутствовать в смывах с контролируемых объектов.
САНИТАРНОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ ИНВЕНТАРЯ, ПОСУДЫ И СМЫВОВ С РУК ПЕРСОНАЛА.
Цель работы: приобретение навыков санитарного обследования предприятий без бактериологического исследования.
Общие сведения
Наряду с бактериологическими исследованиями смывов при санитарном обследовании предприятия могут применяться более простые и доступные методы. Для этого используют индикаторы определения химических веществ.
Практическая часть
Приборы, реактивы, посуда вода, использованная для мойки посуды, фенолфталеин, 0,1 н раствор соляной кислоты, угольный порошок, индикаторные бумажки, смоченные йодисто-калиевым крахмалом.
Методика выполнения работы
Для анализа наличия и концентрации обезжиривающих растворов (щелочи) в воде, используемой для мойки инвентаря, используют метод, основанный на принципе определения предельной щелочности.
В градуированную пробирку с двумя метками, соответствующими 10 мл и 20 мл жидкости, взять исследуемую воду, после мойки инвентаря (до нижней метки) и добавить к ней несколько капель фенолфталеина. При наличии щелочи жидкость окрашивается в розово-красный цвет. Для количественной оценки проводится титрование жидкости в пробирке 0,1 н раствором соляной кислоты до обесцвечивания. Если жидкость обесцвечивается при объеме, не достигшем верхней метки, то концентрация щелочи в моечной воде меньше нижней границы нормы. Минимальная допустимая концентрация гидрокарбоната натрия 0,5%.
Качество обезжиривания посуды можно определить с помощью угольного порошка, взятого в резиновую грушу. Порошок угля, распыленный на поверхности хорошо вымытой сухой посуды, легко сдувается и снимается мягким ватным тампоном. На жирной посуде, обработанной порошком, после удаления его остаются грязные пятна (чем больше остатков жира на посуде, тем пятна темнее).
При санитарном обследовании возникает необходимость проверить наличие в воде, используемой для обработки посуды, инвентаря и рук, дезинфицирующих средств: хлорной извести, хлорамина. С этой целью применяются заранее заготовленные индикаторные бумажки- полоски фильтровальной бумаги, смоченные йодисто-калиевым крахмалом. При смачивании индикаторной бумажки хлорсодержащей жидкостью белый цвет ее изменяется до темно-синего. Под действием обычной водопроводной воды, которая хлорируется, цвет бумаги не меняется.
Контрольные вопросы
1. Укажите санитарные требования, предъявляемые к оборудованию, инвентарю на предприятиях отрасли.