Микробиологическое исследование почвы

Ответьте письменно в тетради на контрольные вопросы:

1. В каких случаях проводят санитарно-бактериологическое исследование почвы?

2. Какие определения включают санитарно-бактериологический анализ почвы?

3. Как проводят отбор проб почвы?

4. Какими методами определяют наличие БГКП в почве?

5. Как определяют микробное число почвы?

8. Как определяют перфрингенс-титр почвы?

Выполните работу.

Техника посева

1 Навеску подготовленной почвы в 1 г переносят в колбу со 100 мл стерильной водопроводной воды.

2 Готовят разведения почвенной суспензии, для чего 1 мл суспензии из колбы последовательно переносят в ряд пробирок с 10 мл стерильной водопроводной воды.

3 Посев на плотные среды производится из разных разведе­ний. Разведение для высева подбирают таким образом, чтобы на чашке развивалось 50-200 колоний.

4 Из каждого образца берут не менее трех повторных наве­сок и каждую высевают не менее чем на трех чашках.

5 На поверхность застывшей и подсушенной среды наносят каплю почвенной суспензии определенного разведения и с по­мощью стеклянного шпателя распределяют ее по всему агару.

Засеянные чашки переворачивают вверх дном и помеща­ют в термостат. Сроки учета микроорганизмов зависят от состава питательной среды и группы учитываемых микроорганизмов. На МПА обычно, на 2-3 сут инкубации учитывают споровые и неспо­ровые формы бактерий. На среде Чапека на 5-7-е сут учитывают колонии актиномицетов, на сусло-агаре на 5-7-е сут – колонии грибов и дрожжей.

Подсчет количества колоний на чашке проводят обычно со дна чашки в проходящем свете. На месте подсчитанной коло­нии чернилами по стеклу или маркером ставится точка.

Подсчитав количество колоний на всех параллельных чашках, вычисляют их среднее число на одной чашке и затем делают пересчет для определения содержания микроорганизмов в 1 г почвы по формуле:

а = б • в • г,

где

а – количество клеток в 1 г почвы;

б – среднее количество колоний на чашке;

в – разведение, из которого сделан посев; г- количество капель в 1 мл суспензии.

Результаты обрабатывают статистически, рассчитывают ошибку среднего арифметического, среднее квадратичное откло­нение и коэффициент вариации.

Вопросы для обсуждения.

1. Какие группы микроорганизмов исследуют в пробах почвы?

2. Какое время необходимо для проведения микробиологического анализа почвы?

3. В каком объеме почвы принято учитывать концентрацию микроорганизмов?